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如何避免DNA鉴定的污染

2012-1-23 22:30| 发布者: fmed| 查看: 1405| 评论: 0|来自: Eppendorf

摘要:   直至今日,仍然没有统一标准来确保STR(短串联DNA重复序列)分析中所使用的耗材和试剂是不含DNA的(标准:DNA浓度应小于6pg)。因此,德国联邦刑事警察局(BKA)联合法医科学研究所联盟—ENFSI, SWGDAM和BASG—计 ...
  直至今日,仍然没有统一标准来确保STR(短串联DNA重复序列)分析中所使用的耗材和试剂是不含DNA的(标准:DNA浓度应小于6pg)。因此,德国联邦刑事警察局(BKA)联合法医科学研究所联盟—ENFSI, SWGDAM和BASG—计划定制一系列措施,确保其DNA数据库免受事故以外的其他污染。 默克密理博首个RNA-蛋白互作RIP试剂盒助您揭开RNA世界的奥秘,点击获取相关资料!   
  九十年代初,德国曾发生一起轰动全国的案件,从这个连续多起杀人并偷窃的案件获得的证据均指向同一名女性罪犯分子,她的DNA图谱分别出现在40起不同案件中,并横跨德国、奥地利和法国三地。然而16年后的真相令人啼笑皆非,这仅仅是一件因DNA污染而误导警方案件调查的案例,所有案件背后并没有令人发指的恶魔存在,所发现的DNA图谱均来自于提取遗传证据所用棉签拭子生产线上的工作人员。同样地,欧洲、美国和澳大利亚的法医科学实验室也发生过类似的案例。已有资料表明,在欧洲数据库的六百万份罪犯的DNA信息中,已掺杂了部分刑侦人员、实验室研究人员和耗材生产人员的DNA信息。  
  英国法庭科学服务局(FSS)通过对比塑料耗材生产人员的DNA图谱和案件中获取的DNA图谱发现,用来收集、处理和分析DNA样品的耗材在生产过程中发生了DNA污染。系统测试结果表明,每25,000个产品如一次性手套、反应器皿、吸头和棉签拭子的生产过程就会产生一条完整的人类DNA基因图谱的污染。因此,欧盟、美国和澳大利亚的法医科学研究所联盟(ENFSI, SWGDAM和BASG)提议建立行业规定,防止因错误DNA数据而造成的刑侦调查投入的巨大浪费,并确保警察局登记处登记资料的准确性。这些措施能大大降低生产过程带来的污染,也可消除痕量DNA合成后的降解。
  然而令人尬尴的事情是,在“耗时16年的德国女性罪犯”案件中使用的棉签拭子没有经过“无DNA”质检,人们也没有对其给予足够的重视。直至今日,仍然没有统一标准来确保STR(短串联DNA重复序列)分析中所使用的耗材和试剂是不含DNA的(标准:DNA浓度应小于6pg)。因此,德国联邦刑事警察局(BKA)联合法医科学研究所联盟—ENFSI, SWGDAM和BASG—计划定制一系列措施,确保其DNA数据库免受事故以外的其他污染。 
  “这种问题是全球性的,不只德国存在”,德国联邦刑警局DNA实验室副主任Ingo Bastisch博士在给DNA分析耗材厂商的信中这样写道。2009年,德国联邦刑警局专家与耗材厂商在德国生命科学供应商协会讨论如何建立行业规定。为防止污染的发生,德国警局计划设立产品认证标准。法医科学研究院联盟负责建立生产过程中的认证和质控流程,以确保产品送至警局时都不会受到DNA污染。所有规定包括:
–自动化生产线
–将工作人员与生产线的接触降低到最小的程度
–洁净的生产车间(工作人员穿隔离衣服、车间正向空气流等)
–建立基于PCR的质量控制检验
–物理方式去除生产线外后续工作的人类DNA,如环氧乙烷气体灭菌
–建立质量控制体系,确保产品不含DNA
  我国也在2009年4月,由公安部科技信息化局和刑事侦查局联合召开DNA检测试剂产品标准及认证工作宣贯会。会上肯定了采用国际通用的产品认证,从源头保证产品质量和安全。公安部要求自2009年8月1日起,各级公安机关新采购的DNA检测试剂产品,必须通过中国安全技术防范认证中心的认证,并加施“GA”认证标志。未通过认证的DNA检测试剂产品,不得用于办案和DNA数据库建设。
  然而对于消耗品目前还没有建立质量控制标准,法医DNA实验室对于关键耗材如离心管、吸头、棉签拭子等使用前先要自行对其进行质量控制检验,确认其指标合格后才能用于DNA检验。因此选择高纯度级别、提供质检证书的耗材,不仅可节省人力成本,更重要的是降低因人员参与而造成的自身污染或交叉污染。
  为了排除参与人员对DNA鉴定结果的污染,法医科学研究所还号召建立国际性的“DNA排查数据库”,即将法医实验室人员、现场警员和生命科学耗材生产人员的DNA图谱纳入其中,以便排除错误的基因图谱,确保获得正确的数据。英国国家DNA数据库(NDNAD)是世界上最早、最大、发挥作用最好的数据库,其中建立了现场警员排除库、实验室人员排除库和耗材生产人员排除库。目前,越来越多的法医实验室和警局对建立匿名的、基于单位的数据库非常感兴趣。“自觉地自我承诺使数据库具有广泛意义,”Eppendorf公司的Claudia Hoffmann说道,由于原有方式几乎不可能追溯到工作人员层面,因此DNA排查数据库这将会使追溯工作更有效。

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